用于检测试剂盒不知道抗原的双抗体夹心法

                                用于检测试剂盒不知道抗原的双抗体夹心法

ELISAS试剂盒用于检测不知道抗原的双抗体夹心法:
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗刷缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗刷，下同)。

2. 加样：加必定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗刷。(一同做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。

3. 加酶标抗体：于各反应孔中，参与新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗刷。

4. 加底物液显色：ELISAS试剂盒于各反应孔中参与暂时制造的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
 
5. 停止反应：于各反应孔中参与2M硫酸0.05ml。

6. ELISAS试剂盒效果断定：可于白色布景上，直接用肉眼查询效果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号标明。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规矩的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。