细胞因子添加中不含载体蛋白或别的添加剂,而且通常以*少数的盐来进行冻干处理,因此微量的细胞因子在冻干过程中会堆积于管内,构成很薄或不行见的蛋白层。 我们建议在收到商品后,必须在开盖前先离心,使粘在管盖或管壁上的蛋白集合于管底(此刻能否见到白色沉积均属正常景象)。 细胞因子添加离心:高速离心20-30秒,或低速离心5分钟。 溶解时不行振动,防止因化学键的开裂形成蛋白失活,可参加恰当的溶剂轻摇并静置一段时间,待细胞因子彻底溶解后运用。 细胞因子溶解时溶剂的选择: 请求用去离子水溶解的商品,细胞因子添加必须不行用盐溶液,防止过高的盐浓度形成蛋白不行逆的分出; 请求用盐溶液溶解的商品,请依照细胞因子说明书上的浓度,相同也是为了防止过高的盐浓度。 溶解:细胞因子用去离子水或其它缓冲液溶解至说明书请求的浓度 (通常为 0.1-1.0 mg/mL,如10ug的商品,需用10uL-100uL的去离子水或缓冲液溶解)。 工作液在4℃可保留1周,如需长时间保留,则需分装冻存于-20℃ (留意:不行冻存于-80℃)。 分装时每管中工作液的体积是一次试验的用量,以完成每次试验用完一只工作液,防止反复冻融导致蛋白活性的下降。 细胞因子添加分装和储存:细胞因子蛋白溶解后可根据自己的试验需求进一步稀释成工作液,稀释可用RPMI 1640、DMEM或PBS等溶液,其间富含5-10%的FCS(小牛或胎牛血清)或0.5 %的BSA(牛血清白蛋白)来稳定蛋白。
人膀胱癌细胞 HT-1376 7 20-1 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁 小鼠海马神经元细胞 HT22 6 30-2&35-2 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁 人结肠癌细胞 HT-29 11 6-4&5-2 McCOY's 5A +10%FBS 人眼小梁网细胞 HTMC 5 10-2 & 29-4 DMEM/F-12+15%FBS HU778 1 26-5 人肝癌细胞 huh-7 19 28-3&2-5 DMEM+10%FBS+1%P/S+1%NEAA 贴壁 人肝癌细胞 细胞因子添加huh-7.5 6 29-4 & 30-1 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁 人肝癌细胞 huh-7.5.1 10 31-3 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁 人胆管癌细胞 HUH28 9 28-1 &7-5&8-1 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁 人皮肤T**瘤细胞 HUT-102 8 32-4 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮 人十二脂肠腺癌 HUTU-80 6 22-4 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁 人静脉内皮细胞 HUV-EC 8 5-2 & 25-2 F-12K+0.1 mg/ml 肝素+0.03-0.05 mg/ml 内皮细胞生长因子+10%FBS
沪公网安备 31011702004356号