C-33 A【人**颈癌】

C-33 A【人**颈癌】代数低，状态好，发货快，细胞库管理规范，种类齐全，价格优惠，在做传代细胞培养之前，首先将培养瓶置于显微镜下，观察培养瓶中细胞是否已长成致密单层，如已长成单层，即可进行细胞的传代培养。

C-33 A【人**颈癌】描述

细胞生长：见说明书

细胞形态：上皮细胞样

细胞数量：1×10⁶个

细胞传代：1:3传代,2-3天传一代

细胞纯度：92.2％

细胞活力：88.4％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**

细胞冻存：液氮冻存（完全培养基+10%DMSO+20%FBS）

细胞运输：干冰运输（1 Vial）或活细胞运输（T-25 flasks）

细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和**

C-33 A【人**颈癌】培养条件

见说明书,90%；上等胎牛血清，10%

气相：空气，95%；二氧化碳，5%

温度：37摄氏度

C-33 A【人**颈癌】传代方法

显微镜下观察细胞，当覆盖80%底面积时，进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代，那样细胞容易老化。在生物**柜或者超净台中，将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞，加入5ml培养基，吹打均匀后，转移到15ml离心管中，1000rpm 离心5分钟离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:3的比例进行细胞传代培养。

C-33 A【人**颈癌】传代密度均匀，有以下几点比较重要：

1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹，一上来就加1-2ml胰酶，结果细胞团大片脱落，虽然有后续吹打步骤，但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞，怎么掌握分寸，还待自己摸索或其他战友分享。

2.在以上基础上，我觉得细胞吹匀，这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管，加入培养液重悬混匀，吸管缓慢吹打20-30次，可配合水平摇晃离心管。

3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究，如6孔板中你*终加入2ml细胞悬液，尤其像这样的小面积培养皿，液体表面有张力，细胞易于聚集在中间，所以我一般6孔板再加1ml以消除影响，吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。

NCTC clone 1469细胞 小鼠肝上皮细胞 DMEM +10%马血清+1%P/S
neuro-2a细胞 小鼠脑神经瘤细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
NK-92细胞 人恶性非霍奇金**瘤患者的自然杀伤细胞 1640+0.2mM肌醇，0.1mM β-Me，0.02mM叶酸，100U IL-2，马血清12.5%，上等胎牛血清，12.5%。
NIH/3T3细胞 小鼠胚胎细胞 DMEM+15%FBS+1%P/S   小牛血清培养不好
NR8383细胞 大鼠肺泡巨噬细胞 F12K+15%FBS+2 mM L-谷氨酰胺+ 1%P/S  悬浮和贴壁混合
NRK-52E细胞 大鼠肾细胞 DMEM+10%小牛血清+10ng/mlEGF+1%P/S 贴壁（FBS养不好）
OAR-L1细胞 绵羊肺成纤维细胞 DMEM+10%FBS+ 1%P/S  贴壁
OCM-1A细胞 人低侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞 1640+10%FBS+1%P/S 
OCI-LY10细胞 弥漫大B细胞**瘤细胞? 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮
OP9细胞 小鼠骨髓基质细胞 MEM-a（无核苷）+20%FBS + 1%P/S 贴壁
OPM2细胞 人骨髓瘤细胞 1640+10%FBS+1%P/S+50uM 2-巯基乙醇 悬浮
OS-RC-2细胞 人肾癌细胞 1640+10%FBS+ 1%P/S  贴壁