种属 人 别称 HMC1 组织来源 癌细胞系 肥大细胞白血病 传代比例/细胞消化 1:2传代 完全培养基配置 IMDM培养基 ；10%胎牛血清 ；1%双抗 形态 细胞样 生长特征 悬浮生长 STR Amelogenin X CSF1PO 10,13 D2S1338 17,25 D3S1358 15 D5S818 12,13 D7S820 10,11 D8S1179 12 D13S317 10,11 D16S539 10,12 D18S51 14,20 D19S433 14 D21S11 29 FGA 18,20 Penta D 11 Penta E 9,19 TH01 7,9.3 TPOX 8,11 vWA 17,19 倍增时间 每周 2-3次 培养条件 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 冻存条件 冻存液：90%FBS，DMSO 10%, 或使用非程序冻存液： 备注 该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液，请勿直接倒掉细胞培养液。 产品使用 于科学研究，不可作为动物或人类的产品使用。
种属
人
别称
HMC1
组织来源
癌细胞系
肥大细胞白血病
传代比例/细胞消化
1:2传代
完全培养基配置
IMDM培养基 ；10%胎牛血清 ；1%双抗
形态
细胞样
生长特征
悬浮生长
STR
Amelogenin X CSF1PO 10,13 D2S1338 17,25 D3S1358 15 D5S818 12,13 D7S820 10,11 D8S1179 12
D13S317 10,11 D16S539 10,12 D18S51 14,20 D19S433 14 D21S11 29 FGA 18,20 Penta D 11
Penta E 9,19 TH01 7,9.3 TPOX 8,11 vWA 17,19
倍增时间
每周 2-3次
培养条件
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件
冻存液：90%FBS，DMSO 10%,
或使用非程序冻存液：
备注
该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液，请勿直接倒掉细胞培养液。
产品使用
于科学研究，不可作为动物或人类的产品使用。
传代方法
显微镜下观察细胞，当覆盖80%底面积时，进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代，那样细胞容易老化。在生物柜或者超净台中，将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞，加入5ml培养基，吹打均匀后，转移到15ml离心管中，1000rpm 离心5分钟离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:3的比例进行细胞传代培养。
传代密度均匀，有以下几点比较重要：
1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹，一上来就加1-2ml胰酶，结果细胞团大片脱落，虽然有后续吹打步骤，但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞，怎么掌握分寸，还待自己摸索或其他战友分享。
2.在以上基础上，我觉得细胞吹匀，这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管，加入培养液重悬混匀，吸管缓慢吹打20-30次，可配合水平摇晃离心管。
3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究，如6孔板中你终加入2ml细胞悬液，尤其像这样的小面积培养皿，液体表面有张力，细胞易于聚集在中间，所以我一般6孔板再加1ml以消除影响，吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。
沪公网安备 31011702004356号
